Invensi ini berkaitan dengan suatu proses produksi enzim protease, lebih khususnya lagi proses produksi enzim protease yang meliputi proses produksi protease secara fermentasi menggunakan galur bakteri Bacillus megaterium DSM 319, melalui tahapan pembuatan prekultur, kultur 100 ml, kultur 1 L pada labu kocok menggunakan media LB cair yang diinkubasikan pada inkubator shaker selama 3-4 jam, suhu 35-40°C, agitasi 150 rpm, sampai diperoleh OD600 0,8-1,0. Inokulum starter 10 L, starter produksi 100 L, dan kultur produksi 1000 L ditumbuhkan pada fermentor menggunakan media molases 2,8% b/v, urea 0,5% b/v dan ekstrak yeast 0,05% b/v, dengan kondisi operasi fermentor pada suhu 35-40°C, aerasi 1 vvm, pO2 minimal 30%, pH 7,5, agitasi 150-200 rpm pada inokulum starter dan starter produksi dengan waktu inkubasi 6-8 jam, sedangkan agitasi 75-150 rpm pada kultur produksi dengan waktu inkubasi sampai protease siap panen selama 14-18 jam, dan/atau pada saat aktivitas protease 20-100 U/ml. Perbandingan volume kultur inokulan terhadap total volume kultur pada tahapan satu dengan tahapan berikutnya adalah 1:10.
